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想讓色譜柱用的久,得“好好用”才行!

點擊次數(shù):1875 發(fā)布時間:2021-07-21
  大家都知道一根色譜柱是比較昂貴的,作為一個色譜耗材,當然是讓色譜柱使用壽命盡量延長以降低成本。而影響色譜柱的使用壽命的因素大多的使用時的操作不當導致?lián)p壞色譜柱。想讓色譜柱用的久,得“好好用”才行!
  使用前,做好這三個階段的操作注意事項:
  一、使用前準備:
  因為生物的復雜性,樣品純化程度越,色譜柱的使用壽命就越長,因此樣品的預處理是十分重要的。比如溶劑的選擇、樣品過濾等。我們可以選擇色譜的純水作為溶劑,并且使用溶劑進樣口過濾器再過濾一次雜質(zhì)、顆粒物等,這樣能較加“純凈”,對延長色譜柱的使用壽命有的幫助作用。
  吸濾頭
  使用色譜柱前還要考慮其他的影響因素,如分析物的某些性質(zhì)同樣能影響色譜柱的使用壽命。酸、堿性物質(zhì)和蛋白質(zhì)類生物大分子,它們能與固定相填料作用,或生成不可逆吸附層,改變填料表面特征,使色譜柱性能發(fā)生變化,終導致分離失效。
  二、使用過程中:
  避免機械沖擊,如果泵啟動太快,流速和柱壓的瞬間升,柱床受到?jīng)_擊,會造成色譜柱損壞;
  利用柱箱保持柱溫恒定,于柱溫承受的范圍,會增加對流動相中化學物質(zhì)的吸附,還可能改變峰形,降低柱效,造成不可逆性的損傷。
  逐漸改變工作流量和壓力,切勿進行突然更改。流速過大,壓力升,會引起色譜填料沖垮、塌陷。
  在適宜的pH范圍內(nèi)運行,以硅膠作基質(zhì)的固定相一般要求pH在2.5~7范圍內(nèi)使用。長期在pH>7或pH<2使用環(huán)境中,硅膠會逐漸溶解或者表面鍵合的官能團會逐漸流失。
  避免進行大體積的進樣導致色譜柱載,不要過度用力擰色譜柱,可能會造成損壞。
  三、使用后的清洗與儲存:
  色譜柱使用后要注意清洗,用較的流動相沖洗,如果還是無法清洗干凈,可以采用更的洗脫劑清洗。
  色譜柱清洗完畢后,絕對不要將色譜柱存儲在冰箱或熱風烤箱中,這可能導致固定相不可逆轉(zhuǎn)的損壞。使用前后輕拿輕放,注意不要磕碰或者用力撞擊導致?lián)p壞。
  即使在采取了建議的預防措施之后,由于色譜柱的使用壽命有限,其性能也會受到影響。您應該定期注意色譜柱的性能,并采取措施觀察峰形的下降,保留時間的變化,分離度差或出現(xiàn)不需要的峰。

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